2024
01-01
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FFPE样本制备及分析——DNA样品质控&实用研究| 实验技术专题
DNA样品质控尽管最佳的裂解和孵育条件可从FFPE样品中释放DNA,部分逆转甲醛修饰,但对于纯化后DNA的下游分析,仍有一些限制。首先,固定过程中的化学修饰可能引入不想要的序列变化,降低DNA稳定性和酶学分析的效率,让A260/A280的纯度分析变得困难。其次,由于FFPE样品中的DNA随时间而逐渐片段化,故只能分析短序列(例如在PCR应用中,应当设计产生短扩增子的引物)。此外,较短的D...阅读... 阅 读 全 部 >
FFPE样本是医学领域常见的生物材料。此类样本已经被广泛应用于高通量测序、原位杂交、免疫组织化学等研究领域。目前,全球约有数亿FFPE组织样本,这些组织样本已经是疾病诊断和科学研究的最为宝贵的生物学资源之一。从FFPE中获得高质量核酸,是顺利推进下游实验的第一步。那么,如何从FFPE样本中获得高品质的核酸来进行下游实验呢?今天小编就来为您支招儿!01什么是FFPE样本?FFPE(For...阅读全...
上期回顾:FFPE样本制备及分析(上篇)| 实验技术专题0 1样本切片石蜡样本在提取前需要进行切片处理,一般需要5-6个切片,一片镜检确定肿瘤细胞含量,其他进行后续提取处理。切片的薄厚程度对后续观察和提取会有一定影响。切片过厚不利于后续染色和组织学观察,而且组织脱蜡和蛋白酶消化困难增加;切片过薄易造成DNA的机械损伤,同时切片总面积的增加,其表面黏附的PCR抑制因子将可能...阅读全文>&g...
肿瘤组织是几乎唯一一种病人愿意让医生切下来的组织,医生对这些组织进行回顾性研究,有助于阐明疾病机制,发现治疗靶标和指示预后恢复。但离体的组织容易丧失原有正常的结构和功能,一般医院没有太好的超低温冷藏条件,而使用福尔马林固定石蜡包埋处理的样本(Formalin-Fixed and Parrffin-Embedded,FFPE)可以在常温保留很久,所以对肿瘤组织进行石蜡包埋保存就成了医院里最常用的.....