技术服务描述

建库流程

从RNA样品提取到最终数据获得，样品检测、建库、测序等每一环节都会直接影响数据的数量和质量，从而影响后续数据分析的结果。为从源头保证测序数据准确可靠，在数据的所有生产环节都严格把关，从根源上确保高质量数据的产出。建库测序的流程如下所示：

1. 
   

   
   Total RNA 样本检测
   

   
   


2. 
   

   
   RNA 富集
   

   
   


3. 
   

   
   双链cDNA合成
   

   
   


4. 
   

   
   末端修复、加A和接头
   

   
   


5. 
   

   
   片段选择和 PCR 扩增
   

   
   


6. 
   

   
   文库质检
   

   
   


7. 
   

   
   Illumina测序
   

   
   

分析流程

RNA-seq的核心是基因表达差异的显著性分析，使用统计学方法，比较两个条件或多个条件下的基因表达差异，从中找出与条件相关的特异性基因，然后进一步分析这些特异性基因的生物学意义，分析过程包括质控、比对、定量、差异显著性分析、功能富集等环节。